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麦氏比浊法测定细菌浓度(麦氏比浊管的使用说明)
上传时间:2020/5/27  点击:

在微生物学中,通过比对溶液浊度,麦氏比浊管常用来校对细菌悬浮液至某个特定浓度。例如在医药学领域常见的微生物抗药物敏感性试验中,用来测量较小抑菌浓度。

麦氏比浊管是通过混合特定浓度的氯化钡和硫酸,从而形成硫酸钡悬浮液。例如0.5号麦氏比浊管是由0.05毫升1%氯化钡溶液加9.95毫升1 %硫酸制成。现在也有由乳胶粒子悬浮液制成的麦氏比浊管,与传统的麦氏比浊管相比,保存时间更长也更稳定。

管号(McFarland)

0.5

1

2

3

4

5

0.25%Bacl2(mL)

0.1

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1%H2SO4(mL)

4.9

4.8

4.6

4.4

4.2

4.0

细菌的近似浓度(×10^8/mL)

1.5

3

6

9

12

15

细菌的近似浓度(百万/ mL)

150

300

600

900

1200

1500

【使用方法】

1、 轻摇标准试管。

2、 无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、 以无菌操作向被测定试管加入无菌蒸馏水,直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

【计算被测培养物试管的浓度】:

1、0.5号麦氏浊度标准管约相当于1.5×10^8个细菌/ml。

2、1.0号麦氏浊度标准管约相当于3×10^8个细菌/ml。

3、细菌浓度标准管号×3×10^8=该管号的细菌数/ml。

3、如果是酵母。相应的数值要除以30。

【制备所要求的浓度,如需要10^5细菌的浓度】:

1、相当1.0号麦氏浊度标准管(3×10^8)的细菌作1:3稀释到10^8。

2、再作1:1000稀释。为1×10^5个细菌/ml。

3、10^8÷10^5=10^3

【注意事项】:

A

1、若有大颗粒出现,此标准管应更换。

2、该比浊管仅用于微生物检验中,生化试验的细菌数量估算,不可用于精密定量。

3、该玻璃管和盖子可以高压灭菌、可以重复使用。

4、标准无菌生理盐水管仅用于空白对照,请勿用于配制样品管。

B

1、如果测定的肉汤培养物不澄清,则由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。

例: 4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。